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GIBCO 16140-071熱滅活胎牛血清FBS幾大特點
瀏覽次數:1063發布日期:2018-12-24

GIBCO 16140-071熱滅活胎牛血清FBS幾大特點

根據血紅蛋白含量的不同,胎牛血清可表現出黃色或紅色,我國的細胞培養用血清標準是不高于20mg/dl,實際上,血紅蛋白含量的高低對血清并無直接影響,這個指標的意義在于能體現出采血過程的嚴謹規范程度,良好的操作能降低血清的溶血。
國產血清的采血點很分散,大多是由屠戶采血后馬上離心收集,所以很少會有溶血,表現出明亮的蠟黃色,當然,國產血清也很少有標準意義上的胎牛血清。

 

主要技術指標
目前國內血清的質量標準是2005版的《中華人民共和國藥典》,主要指標有以下幾點:

1、內毒素
標準為不高于5EU/ml。內毒素是細菌破碎后細胞壁的成分,因此內毒素含量的高低可表現出采血到生產一系列過程中的無菌操作情況。目前,國產血清基本都能達到這一要求,很多進口胎牛血清內毒素含量反而更高,如Gibco 26140,只要求不高于50EU/ml,高出我國標準10倍,即使是16000,也要10EU/ml,血清質量也未見影響。可見,內毒素含量偏高不影響質量,除非含量極高,預示著已經污染。

2、總蛋白含量
胎牛血清一般范圍是30-40mg/ml,數值偏高,說明采血的牛齡偏大,不是胎牛,數值偏低,表明血清可能摻水了。

3、血紅蛋白
標準為不高于20mg/dl,顏色越紅,數值越高,反之,數值越低。

4、pH
國產血清,大多高于7.5,進口胎牛血清,大多低于7.5,具體原因未知,可能和牛齡有關,這也能用來初步鑒別血清的來源。

5、微生物
包括細菌、霉菌、支原體、噬菌體、各類病原性病毒等。隨著國內血清廠家生產條件的改善提高,細菌、霉菌等“大型”微生物幾乎能100%控制,支原體經過0.1um過濾,大多也能清除。大腸桿菌噬菌體的污染還是比較嚴重的,主要是生產環境過程中帶入,又無法過濾,很難徹底清除,但對血清質量影響不大。病原性病毒,特別是BVDV,在國產血清中幾乎90%以上都存在,這類微生物是影響國產血清質量的重要因素之一,而進口胎牛血清中基本都控制的很好。

6、免疫球蛋白
國產血清的只是定性檢測,結果也很不準確,進口胎牛血清大多定量檢測。免疫球蛋白的數值能完全體現出采血的時的牛齡情況,國產血清,基本都是新生牛的,血清中容易產生IgM,IgG的含量也偏高,進口胎牛血清,不含IgM,IgG的含量也較低。

7、其它
不管是國產還是進口血清,都是不測抗生素的(無四環素胎牛血清除外)。國外,抗生素的使用很嚴格,用量也很少,每頭奶牛的產品包括血清都可以溯源的,因此可以做到胎牛血清中不含抗生素或含量極低;國內,抗生素的濫用已成了普遍現象,血清中殘留很高,對細胞培養極為不利,這是國產血清質量差的根本原因。

牛血清質量檢定指標:

1、化學檢定:包括滲透壓(240~340)、pH(7.0~8.0)、總蛋白含量(3.5~5.0%)、血紅蛋白 (≤0.02%)
2、 微生物檢查:細菌和真菌——直接培養法、噬菌體——噬斑法和增殖法 支原體——培養法和DNA染色法 、牛病毒——細胞培養法。要求均為陰性
3、 內毒素檢測——凝膠法和動態濁度法 要求內毒素含量≤10EU/ml
4、 促細胞生長測定(SP2/0-Ag14標準規定)
a.zui大增殖濃度≥1.0×106個/ml、倍增時間≤20小時 克隆率=(陽性孔平均數/培養孔總數)×100%
b。貼壁效率( VERO細胞、二倍體細胞等) 10%血清――50或100個細胞/孔
貼壁效率(%)=(每孔克隆平均數/每孔存活的培養細胞平均數)×100 相對貼壁效率=被測血清貼壁效率/參考血清貼壁效

 

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