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GIBCO 16140-071热灭活胎牛血清FBS几大特点
浏览次数:746发布日期:2018-12-24

GIBCO 16140-071热灭活胎牛血清FBS几大特点

根据血红蛋白含量的不同,胎牛血清可表现出黄色或红色,我国的细胞培养用血清标准是不高于20mg/dl,实际上,血红蛋白含量的高低对血清并无直接影响,这个指标的意义在于能体现出采血过程的严谨规范程度,良好的操作能降低血清的溶血。
国产血清的采血点很分散,大多是由屠户采血后马上离心收集,所以很少会有溶血,表现出明亮的蜡黄色,当然,国产血清也很少有标准意义上的胎牛血清。

 

主要技术指标
目前国内血清的质量标准是2005版的《中华人民共和国药典》,主要指标有以下几点:

1、内毒素
标准为不高于5EU/ml。内毒素是细菌破碎后细胞壁的成分,因此内毒素含量的高低可表现出采血到生产一系列过程中的无菌操作情况。目前,国产血清基本都能达到这一要求,很多进口胎牛血清内毒素含量反而更高,如Gibco 26140,只要求不高于50EU/ml,高出我国标准10倍,即使是16000,也要10EU/ml,血清质量也未见影响。可见,内毒素含量偏高不影响质量,除非含量极高,预示着已经污染。

2、总蛋白含量
胎牛血清一般范围是30-40mg/ml,数值偏高,说明采血的牛龄偏大,不是胎牛,数值偏低,表明血清可能掺水了。

3、血红蛋白
标准为不高于20mg/dl,颜色越红,数值越高,反之,数值越低。

4、pH
国产血清,大多高于7.5,进口胎牛血清,大多低于7.5,具体原因未知,可能和牛龄有关,这也能用来初步鉴别血清的来源。

5、微生物
包括细菌、霉菌、支原体、噬菌体、各类病原性病毒等。随着国内血清厂家生产条件的改善提高,细菌、霉菌等“大型”微生物几乎能100%控制,支原体经过0.1um过滤,大多也能清除。大肠杆菌噬菌体的污染还是比较严重的,主要是生产环境过程中带入,又无法过滤,很难彻底清除,但对血清质量影响不大。病原性病毒,特别是BVDV,在国产血清中几乎90%以上都存在,这类微生物是影响国产血清质量的重要因素之一,而进口胎牛血清中基本都控制的很好。

6、免疫球蛋白
国产血清的只是定性检测,结果也很不准确,进口胎牛血清大多定量检测。免疫球蛋白的数值能完全体现出采血的时的牛龄情况,国产血清,基本都是新生牛的,血清中容易产生IgM,IgG的含量也偏高,进口胎牛血清,不含IgM,IgG的含量也较低。

7、其它
不管是国产还是进口血清,都是不测抗生素的(无四环素胎牛血清除外)。国外,抗生素的使用很严格,用量也很少,每头奶牛的产品包括血清都可以溯源的,因此可以做到胎牛血清中不含抗生素或含量极低;国内,抗生素的滥用已成了普遍现象,血清中残留很高,对细胞培养极为不利,这是国产血清质量差的根本原因。

牛血清质量检定指标:

1、化学检定:包括渗透压(240~340)、pH(7.0~8.0)、总蛋白含量(3.5~5.0%)、血红蛋白 (≤0.02%)
2、 微生物检查:细菌和真菌——直接培养法、噬菌体——噬斑法和增殖法 支原体——培养法和DNA染色法 、牛病毒——细胞培养法。要求均为阴性
3、 内毒素检测——凝胶法和动态浊度法 要求内毒素含量≤10EU/ml
4、 促细胞生长测定(SP2/0-Ag14标准规定)
a.zui大增殖浓度≥1.0×106个/ml、倍增时间≤20小时 克隆率=(阳性孔平均数/培养孔总数)×100%
b.贴壁效率( VERO细胞、二倍体细胞等) 10%血清――50或100个细胞/孔
贴壁效率(%)=(每孔克隆平均数/每孔存活的培养细胞平均数)×100 相对贴壁效率=被测血清贴壁效率/参考血清贴壁效

 

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